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http://hdl.handle.net/10609/119526
Título : | Engineering of formate dehydrogenase for the acceptance of a biomimetic nicotinamide-based cofactor in the reduction of CO2 |
Autoría: | Teijeiro Seijas, Vanesa |
Tutor: | Ortega-Carrasco, Elisabeth |
Otros: | Merino, David |
Resumen : | La enzima formato deshidrogenase (FDH) es ampliamente utilizada para la regeneración del cofactor NAD(P)H. Debido al alto precio del cofactor natural, su regeneración es crítica cuando se trabaja con enzimas que lo requieren. Otro uso de FDH es la reducción de CO2 a ácido fórmico. Los cofactores biomiméticos se crearon como una alternativa al cofactor natural. Sin embargo, no hay estudios que los integren con la enzima FDH. En este estudio, utilizando el acoplamiento molecular, el cofactor biomimético P3NAH fue seleccionado como el que mejor se acomoda en el centro activo de FDH de Pseudomonas (PsFDH) y puede reducir el CO2. Con el objetivo de crear una mutante de PsFDH que acomode la parte de nicotinamida de P3NAH en una posición similar a la nicotinamida de NADH, se modificaron residuos en el túnel de acceso del cofactor y en el centro activo de la enzima. La estructura de las mutantes se generó con modelado de homología. Al cambiar el residuo Ser 380 por Gly, la nicotinamida de P3NAH se sitúa en una posición más cercana a la posición de NADH. La enzima sin modificar sitúa la molécula P3NAH con una distancia promedio entre átomos de P3NAH y residuos relevantes de 1.2 Å mientras que la mutante 2NADa_S380G lo acomoda con una distancia promedio de 0.25 Å. Además de los resultados de acoplamiento aceptables para P3NAH, la estabilidad de la proteína y el transporte de ligando de 2NADa_S380G es aceptable, por lo que esta mutante es más adecuada para la reacción con P3NAH que la enzima sin modificar. |
Palabras clave : | ingeniería de proteínas formato deshidrogenase cofactor de nicotinamida biomimético |
Tipo de documento: | info:eu-repo/semantics/masterThesis |
Fecha de publicación : | ene-2020 |
Licencia de publicación: | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/es/ |
Aparece en las colecciones: | Trabajos finales de carrera, trabajos de investigación, etc. |
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